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緩沖溶液的概念——Tris、HEPES等

更新時(shí)間:2025-11-24   點(diǎn)擊次數(shù):325次

緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過程中的重要溶液,對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以最常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷(簡(jiǎn)稱Tris)-HCl緩沖溶液、羥yi基pai嗪乙磺酸(供注射用)(簡(jiǎn)稱HEPES)緩沖溶液為例,介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。

對(duì)于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等)而言,實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮zuihao的治療效果。

在這些反應(yīng)過程中酸堿緩沖溶液經(jīng)常發(fā)揮著非常重要的作用。如人體血漿中存在NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等緩沖對(duì)構(gòu)成血漿的酸堿緩沖系統(tǒng),以維持正常人血漿的pH值在7.35~7.45。若血漿pH值低于7.35或者高于7.45則分別會(huì)引起酸中毒和堿中毒,危及生命。

緩沖液的概念

酸堿緩沖溶液是指能夠抵抗外加少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿以及水的稀釋作用,并維持溶液pH值基本不變的溶液。常見的緩沖溶液需具備酸堿緩沖對(duì),緩沖對(duì)可以是兩種不同的物質(zhì),如HAc-NaAc緩沖溶液中的HAc和NaAc,也可以是一種物質(zhì)里同時(shí)含有互為共軛酸堿的不同基團(tuán),如鄰苯二甲酸氫鉀中的羧基(-COOH)和羧酸根(-COO-)。當(dāng)然,濃度很大的強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液中即使不含有酸堿緩沖對(duì)也有一定的緩沖能力,因?yàn)橥饧由倭康乃峄驂A對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿的濃度變化影響很小,所以pH值基本不變。

緩沖溶液的作用原理是通過互為酸堿緩沖對(duì)之間的酸堿平衡移動(dòng)來抵御外加少量酸、堿以及稀釋作用的。緩沖溶液自身pH值可根據(jù)公式進(jìn)行計(jì)算,緩沖溶液的緩沖能力可以用緩沖容量進(jìn)行標(biāo)度。但是,任何緩沖溶液的緩沖能力都是有限的,因?yàn)楫?dāng)大量的H+或OH-進(jìn)入溶液時(shí),緩沖溶液中的緩沖對(duì)將被大量消耗,抗堿、抗酸的作用也隨之減弱直到消失。

實(shí)際應(yīng)用中各緩沖對(duì)組成的緩沖溶液都有最佳的緩沖范圍。在實(shí)際生產(chǎn)過程中,如果選擇的緩沖溶液緩沖范圍與預(yù)期偏差較大,使用大量強(qiáng)酸/強(qiáng)堿或許可以強(qiáng)行將溶液pH調(diào)至預(yù)期值,但此時(shí)溶液體系的緩沖容量已消耗殆盡,無法起到應(yīng)有的緩沖保護(hù)效果,對(duì)制劑產(chǎn)品后續(xù)的加工及長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性造成影響。




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